親水作用色譜柱是一種直接分離極性和親水性化合物的色譜技術，為了便于理解，我們可以把它看作為是一種用反相色譜溶劑作流動相的正相色譜。因此，HILIC是親水性的流動相，以水、有機溶劑和緩沖鹽作為流動相。常見的HILIC方法采用50%~90%有機溶劑和一定比例的水，并且含有低濃度的緩沖鹽。如乙腈/水/醋酸銨體系。在HILIC方法中，洗脫順序和反相色譜正好相反，即極性越大，保留時間越長。